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一、概述
Magarose®️是厦门美博泰生物独家注册的琼脂糖磁性微球商标，内含顺磁性纳米颗粒的琼脂糖（6％）交联而成，粒径10~30 μm，保证了高比表面积、易悬浮、快速磁分离等特性，显著加速操作和实验的重现性。
CNBr活化磁性琼脂糖微球，可用于制造各种磁性亲和色谱吸附剂，适用于小规模和大规模纯化应用。CNBr活化的琼脂糖在定制亲和色谱填料的制备和使用方面有着良好的良好记录。将生物特异配体与CNBr活化的磁性琼脂糖微球结合是一种广泛使用、成功且文献详实的技术。偶联反应自发、快速且易于执行。无需有毒化学品或特殊设备。 应用领域涵盖蛋白质、肽和核酸的固定化。
图1. CNBr活化琼脂糖磁珠固定含胺分子
二、产品特性
产品名称
Magarose-CNBr
货号
PMAG011
磁珠浓度
冻干粉
配基密度
~ 90 μmol CNBr/ ml磁珠
介质
6%交联磁性琼脂糖
粒径
10 ~ 30 μm
配体结合
>20 mg BSA/ml磁珠
保存
常温运输，2~8℃保存一年
注：磁珠蛋白结合量与目标蛋白特性相关，此处仅作参考。
三、使用方法
1. 产品特点
w 偶联条件温和(pH8~10、4~45°C、时间1~16小时)，偶联效率高(每1 mL磁珠可偶联18~30 mg BSA)。
w 填料不需要处理，直接计算合适的量用于偶联。
w 保存时间长，4~8 ℃可以保存一年半，-20℃可以保存2年，同时应该避免受潮。
w 可偶联包含多糖，蛋白，核酸，抗体以及其他含有NH2配基的物质，使用范围广。
2. 蛋白偶联操作步骤
以用该CNBr活化琼脂糖磁珠偶联牛血清白蛋白(BSA)为例：
1) 取BSA 100 mg溶解于10 ml的0.25 M碳酸钠缓冲液中，pH9.0。
2) 将磁珠用0.25 M碳酸钠缓冲液（pH9.0）溶胀后，吸取适量的磁珠，用上述缓冲液洗涤2次。
3) 将5 mL磁珠加入溶解后的BSA 溶液中混合，在摇床上振荡，25℃偶联6小时。
4) 然后加0.1M Tris-HCl，pH8.3，再反应6个小时封闭剩余的基团。
5) 偶联了BSA 的磁珠，用1 M NaCl 溶液洗3-5次，收集偶联后剩余的液体以及洗涤的溶液测定BSA 的总量，再用纯水洗涤磁珠3次，最后将磁珠保存在相应蛋白保存缓冲液中。
6) BSA 的偶联量为25 mg/ml. 计算方法：BSA 的吸附载量=（G0—G1）/V。
G0：BSA 总使用量，单位：mg；
G1：偶联反应后未偶联的 BSA 的量，单位：mg；
V：填料的体积，单位：mL；
备注：该偶联方法可用于偶联单抗及其它蛋白，均能获得很好的偶联效果。
3. 注意事项
1) 活化的填料现取现用，免时间过长造成偶联活性降低。其余的可以密封4~8℃保存1年半，避免潮解。但是最好的-20℃密封保存，这样可以保存放两年。
2) 如果要偶联的蛋白不稳定，可在摇床上4°C振摇偶联12~16 小时，以维持配基的活性。如果没有把握可以配相应浓度的配基溶液0.5~1 ml，分别选择不同pH 及温度然后不加填料模拟偶联条件，到时间观察溶液是否有沉淀，如果有沉淀偶联效果就不好，这时可以稍微降低pH 或温度，同时可以加2.5%左右的甘油或PEG 保护蛋白，避免沉淀，总之对于任何配基最好能了解其溶解性及稳定性，避免实验失败导致损失。
3) 偶联配基后尽快清洗填料，避免在高pH 条件中，配基失活。
4) 更稳定的配基可以直接溶解于NaOH 溶液或者碳酸钠溶液中进行偶联，温度可适当提高，偶联时间则相应缩短至1~4小时。
5) 偶联蛋白的最适pH为可以在8.0~10左右，在室温或4°C均可，温度与pH 的提高均能增加配基的吸附载量，根据蛋白的稳定选择合适的pH 和温度，偶联蛋白溶液的浓度为5~20 mg/ml。磁珠体积和配基溶液的体积为1：1.5 或者为1：2。
6) 偶联的缓冲液包括碳酸盐、硼酸盐和磷酸盐缓冲液，但绝对不能使用Tris、甘氨酸等含有氨基的物质。
7) 偶联的物质如果是小分子的化合物，例如氨基酸或其他带NH2 的小分子配基，那可以直接把配基加到0.05 M NaOH 或0.5M 碳酸钠溶液中配置成10~20 mg/ml 的溶液，其他条件不变，这样偶联效果更好。
8) 在偶联中要把填料能混匀完全悬浮起来，避免剧烈搅拌使填料有小颗粒降低流速。
9) 本试剂只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果概不承担责任。
本产品仅供科研用途！
