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样品制备对于从生物样品中提取大分子至关重要。细胞或组织的破碎方法很多,珠磨法是一种有效的细胞组织破碎方法。进入珠磨机内的细胞悬浮液与极细的玻璃珠、氧化锆珠、不锈钢珠、石榴石等研磨料一起快速搅拌或研磨,利用破碎珠在高速运转下的相互碰撞,可破碎微生物和动植物组织,释放内含物。该方法简便稳定、破碎率可控、易放大,无论实验室还是工业规模,破碎效果十分理想。为避免样品间交叉污染,珠子和离心管都是一次性的。研磨珠大小、形状、材料和组成各不相同,在选择合适研磨珠时,请考虑样品类型、所需颗粒尺寸及目标分子的稳定性。无论您的样品多坚韧,研磨珠将有效破坏细胞壁,在几秒钟内提供最高产量的核酸和蛋白质。
样品的可变性:不同的样品在珠磨均质过程中的弹性不同。即使是中等弹性的样品,也可以通过使用珠磨机,有效地进行均质处理。一个有效的均质化方法是在样品质量、容器体积、研磨介质材料和尺寸之间找到平衡。对一个样品有效的方法不一定对另一个样品有效,所以通常需要进行一些方法开发,以建立最佳方案,达到预期的目标。
处理参数:无论采用何种形式,样品容器必须能够承受研磨珠和球的冲击。聚碳酸酯容器是一个很好的选择,因为它们透明、耐用、耐冲击,并有能力承受低温。然而,由于聚碳酸酯与许多有机溶剂不相容,可使用耐受的聚乙烯或聚丙烯管和深孔板代替--尽管这些管子在与金属研磨球一起使用时容易发生机械断裂。
样品的大小和类型:必须与适当大的均质容器和研磨介质相匹配,共同有效地使样品均质。研磨介质必须自由移动以磨碎样品,因此,管子里不能装太多的珠子或缓冲液。一般来说,样品不应超过容器容积的1/6;研磨介质不应超过1/3。
研磨介质分类:珠子—— 一定尺寸分布的珠子。小珠子最适合于破坏较小尺寸样品,如细菌或酵母;而较大的珠子或研磨球则最适用于植物和动物组织。球——精确到特定直径的球形。(在某些缓冲液中,不锈钢会与酚类化合物发生反应。当不锈钢与某些缓冲剂中的酚类化合物发生反应时,可用陶瓷作为替代物)。陶瓷/研磨树脂——尖锐和不规则形状的复合材料。
高密度研磨介质,如不锈钢和氧化锆通常比玻璃珠更有效;但前者在研磨过程中易产生热量。此外 一些从研磨珠上剪切下来的材料会抑制一些酶的反应。因此,没有一种介质可适用于所有应用。
一般来说,研磨介质在使用前应进行清洗以消除污染。酸洗是最常见的方法,尽管热处理可消除潜在的核酸酶或核酸来源。也有低结合力的珠子可减少非特异性结合,从而使更多的分析物保持在悬液中。
低温均质:一些难以研磨的样品需进行低温研磨。这种技术对于难以研磨的样品和需要制备温度敏感的样品都很有用。
厦门普睿迈格生物科技有限公司提供适合于各种不同研磨器的配套研磨珠子,可以满足生物细胞及组织样品研磨工作中的不同需求。
产品名称
型号
尺寸
包装
应用对象
Glass beads
玻璃研磨珠
PMGB-G-001
0.1 mm
500 g / 瓶
微生物、细菌、环境样品(空气、水、土壤、沉积物和支持生物膜)
PMGB-G-005
0.5 mm
酵母、环境样品(空气、水、土壤、沉积物和支持生物膜)
PMGB-G-010
1.0 mm
PMGB-G-025
2.5 mm
真菌、真菌体
PMGB-G-035
3.5 mm
真菌、真菌体、动物软组织(如血液、肝脏、大脑和胸腺)、纤维组织
PMGB-G-064
6.4 mm
植物叶片、植物茎、植物种子、动物组织、真菌、真菌体
Zirconium beads
氧化锆研磨珠
PMGB-Z-001
100 g / 瓶
微生物、细菌、环境样品(空气、水、土壤、沉积物和支持生物膜)、植物花粉
PMGB-Zr-002
0.2 mm
酵母
PMGB-Zr-005
植物花粉
PMGB-Zr-010
真菌、丝状真菌、植物花粉
PMGB-Zr-020
2.0 mm
真菌、假菌丝体
PMGB-Zr-030
3.0 mm
PMGB-Zr-040
4.0 mm
PMGB-Zr-070
7.0 mm
PMGB-Zr-100
10.0 mm
植物叶片、植物茎、植物种子、动物组织
Stainless steel beads
不锈钢研磨珠
PMGB-S-010
PMGB-S-020
真菌、真菌体、植物叶片、植物茎、动物软组织
PMGB-S-030
真菌、真菌体、植物叶片、植物茎、动物软组织(如血液、肝脏、大脑和胸腺)、纤维组织
PMGB-S-040
植物叶片、植物茎、动物软组织(如血液、肝脏、大脑和胸腺)、纤维组织
PMGB-S-095
9.5 mm
PMGB-S-110
11.0 mm
Garnet flakes/beads
石榴石研磨珠
PMGB-GF-007
0.7 mm
动物软组织(如血液、肝脏、大脑和胸腺)、纤维组织
部分客户使用该产品论文:
[1] 易明玉. Linc-ROR通过调节miR-204-5p/SMAD4促进子宫内膜异位症相关上皮间质转化[D].中南大学,2022.DOI:10.27661/d.cnki.gzhnu.2022.000448. [2] 吴黎. 基于Wnt/β-catenin通路对回阳生肌膏治疗糖尿病大鼠阴证创面的作用机制研究[D].北京中医药大学,2021.DOI:10.26973/d.cnki.gbjzu.2021.000330.