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一、概述
Magarose®️是厦门美博泰生物独家注册的琼脂糖磁性微球商标，内含顺磁性纳米颗粒的琼脂糖（6％）交联而成，粒径10~30 μm，保证了高比表面积、易悬浮、快速磁分离等特性，显著加速操作和实验的重现性。
巯基活化琼脂糖磁珠（Magarose-SH）是一种6%交联的磁性琼脂糖微球，是一种活性功能化色谱基质，其核心特性在于微球表面密布着具有强亲核性、易发生氧化还原反应以及对特定重金属离子具有极高亲和力的游离巯基。巯基琼脂糖磁珠（Thiol / Sulfhydryl Magarose Beads）在长间隔臂的末端含有反应性巯基，与马来酰亚胺（maleimide）、碘乙酰（iodoacetate）和吡啶二硫基（pyridyldithiol）修饰配体共价偶联，用于亲和纯化。在生物医药、生物化学研究及工业纯化领域，巯基琼脂糖微球对于固定肽而言是理想的，用于抗体或其他结合配偶体的亲和纯化。
二、产品特性
产品名称
Magarose-SH
货号
PMAG020
磁珠浓度
25% (v/v) in 20% EtOH，1mMEDTA， pH4.0-4.5
配基密度
~ 40 μmol / ml磁珠
介质
6%交联磁性琼脂糖
粒径
10 ~ 30 μm
配体结合
>20 mg Protein/ml磁珠
保存
常温运输，2~8℃保存一年
注：磁珠蛋白结合量与目标蛋白特性相关，此处仅作参考值。
三、使用方法
1. 所需材料
偶联缓冲液：PBS，pH 7.2
SMCC（磺酸琥珀酰亚胺基4-[N-马来米甲基]环己烷-1-羧酸酯或Sulfo-SMCC
2. 蛋白质/肽类制备
1) 将蛋白多肽置于50倍体积PBS缓冲液（pH值7.2，5mM EDTA）进行透析。
2) 向蛋白质溶液中加入适量的SMCC，搅拌均匀。
3) 注意：准备SMCC溶液（3.7mg/ml，DMF中）。如果SMCC未完全溶解，将管子放入50℃的水浴中数分钟。将100μl的SMCC溶液加入1ml蛋白质溶液（10mg/ml），或50μl的SMCC溶液加入1ml蛋白质溶液（<1mg/ml）。
4) 在4℃下孵育2h或室温30min。
5) 在Sephadex G15柱上去除游离SMCC和未修饰蛋白。用PBS缓冲液洗脱。洗脱下来的protein-SMCC可以用分光光度计在206nm处监测。
3. 磁珠制备
1. 摇晃瓶子，彻底重悬Magarose-SH磁珠。
2. 将20μl-60μl的珠子（25%，v/v）转移到管子中。把管子放在磁性架上1-3分钟。磁分离，去上清液。
3. 取出管子，并用100μl PBS缓冲液彻底重悬磁珠。将管子放在室温下2-3min。磁分离，去上清液。
4. 重复步骤3两次。
5. 将磁珠与1ml 的DTT（二硫代糖醇3 mg/ml）在室温下孵育15min，并用PBS缓冲液清洗三次。
6. 将还原珠与蛋白-SMCC偶联物混合，在4℃下振荡孵育12h。
7. 清洗磁珠后重悬于目标缓冲液中（适配你所偶联的蛋白的缓冲液）。
