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PuriMag PCRbead磁性微球专为PCR产物提取和纯化而设计,表面修饰大量硅羟基,能在高盐、低pH条件下和溶液中的核酸通过疏水作用、氢键作用和静电作等发生特异性结合,配合缓冲体系,可便捷回收PCR产物中的DNA,有效去除引物二聚体、dNTP、无机盐及蛋白质等杂质,整个过程操作简单快速,15分钟即可完成PCR产物的纯化。本产品具有回收DNA片段范围广、操作安全简单、回收率高,DNA纯度高等特点,非常有利于核酸的自动化和高通量提取,回收的DNA可直接用于酶切、测序、PCR反应等后续操作。
郑重提示:对于一次订购量大者,本品将提供极具竞争力的市场价格,实现最优性价比。
■ 产品性能
核酸结合能力强:比表面积>25 m2/g ,核酸结合能力>15ug DNA/mg 磁珠;
操作性能好:磁珠分散均匀,具有超顺磁性,饱和磁化强度为70-80emu/g,磁相应时间<30s;
稳定性及批次间重复性好:粒径均一,呈单分散,保证良好结果重现性;
保存稳定性好:完整的氧化硅层包覆,使用性能稳定,耐6M盐酸酸蚀>5分钟;
适合DNA片段范围广:150bp~50kb;
回收率高:回收率高达80%以上;
DNA纯度高:回收的PCR产物纯度高,A260/280=1.7~1.9,A260/230=1.9~2.3;
操作快速简单:15分钟即可完成整个操作流程,无需离心;
可适用于自动化、高通量PCR产物纯化;
■ 应用方向
PCR产物纯化;
本品推荐用量为PCR样本等体积磁珠;
■ 注意事项
1、 磁珠保存在去离子水中,冷冻、干燥和离心可能会影响磁珠的使用效果;
2、 磁珠由于重力作用而沉降属于正常现象,在使用本产品前,请务必充分振荡或超声使磁珠保持均匀的悬浮状态;
3、 磁珠在2~8℃可稳定保存2年。
■ 使用方法
试剂组成 PuriMag PCRbead:使用前涡旋20秒,使其彻底混匀。
Wash buffer: 可用75%乙醇替代(现配现用,4℃保存时间不超过7天);
Elution buffer: 可用纯水或TE缓冲液pH8.0替代;
操作步骤:
1) 向1.5 ml的离心管或PCR管中加入待纯化的PCR产物, 然后加入2倍样品体积的PuriMag PCRbead,颠倒混匀数次,磁分离后吸弃上清液。
2) 向离心管中加入150 μl Wash buffer,移液枪缓慢吹打混匀,静置1分钟,然后将离心管放到磁力架上静置30秒,小心吸弃上清液。重复上述步骤1次,上清液尽量移除干净,以免影响后续实验。室温晾干5 min,让残留乙醇挥发干净,以免影响后续实验。
3) 向离心管中加入20~50ul的Elution buffer,移液枪缓慢吹打混匀1-2 min,将离心管放到磁力架上静置30秒,小心将上清液吸入新离心管中,即为纯化的PCR产物,可存放于2-8℃,长期存放需放置于-20℃。(Elution buffer在65-70℃中预热后洗脱效果更好,减小洗脱体积或多次洗脱可增大DNA浓度)
部分客户使用磁珠论文:
[1]田甜. 黑龙江地区特发性膜性肾病与PLA2R基因多态性的研究[D].黑龙江省中医药科学院,2022.DOI:10.27126/d.cnki.ghlzy.2022.000019. [2]张志鹏. SLC26A4基因突变导致一个家系耳聋的研究分析[D].苏州大学,2021.DOI:10.27351/d.cnki.gszhu.2021.002300.