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免疫磁珠(Immunomagnetic Beads,IMB)简介|免疫磁性微球(Immunomagnetic Microspheres,IMMS)简介

2017-12-16 22:59:14点击:

免疫磁性微球(Immunomagnetic Microspheres,IMMS),或称免疫磁珠(Immunomagnetic Beads,IMB)免疫磁珠,是近年来发展起来的一项新的免疫学技术,运用核-壳的合成方法合成含有超顺磁性物质的高分子表面覆盖的复合材料、稳定性好、能进行后期标记的物质,利用这些物质表面的功能集团如氨基、羧基、巯基等进行抗体的共价或者非共价偶联,可用于结合相应的抗原或抗体,这样在外加磁场的吸引下可做定向移动,从而达到分离,检测,纯化基因、蛋白质、细胞、微生物等的目的。它将固化试剂特有的优点与免疫学反应的高度特异性结合于一体,以免疫学为基础,渗透到病理、生理、药理、微生物、生化以及分子遗传学等各个领域,其在免疫检测、细胞分离、生物大分子纯化和分子生物学等方面得到了越来越广泛的应用。

免疫磁珠法 (MACS):免疫磁珠法是 20世纪 80年代出现的技术方法。1983年 Ugelstad提出将免疫磁珠用于细胞分选,1990年,Mihenyi建立了 MACS。这一方法的核心是在磁珠表面包被具免疫反应性的抗体进行抗原抗体反应,在细胞表面形成玫瑰花结,这些结合了磁珠的细胞一旦置于强大的磁场下,就会与其他未被结合的细胞分群,具超强顺磁场的磁珠脱离磁场后立即消失磁性,这样就可以筛选或去除所标记的细胞 ,从而达到阳性或阴性选择细胞的目的。这一技术 目前已经广泛运用于细胞及分子生物学,分离基因、靶细胞及造血干细胞等。其分离效果得到了免疫荧光、PCR、FISH及 FACS等方法的确认。免疫磁珠可以有效地分选细胞,从而决定了这一方法在神经干细胞分选中应 用的技术可行性 。

1、按核磁表面覆盖高分子的成份分主要有聚苯乙烯、聚纤维类;
2、按表面的基团分主要可分为氨基磁珠、羧基磁珠、硅基磁珠、链霉素、亲和素、醛基、巯基;
3、按粒径分主要有50nm、80nm、100nm、200nm、500nm、1000nm、2000nm。


代表性的产品

dynal bead: 以1um和2.8um磁珠为代表,最早商业化,应用最为广泛。但尺寸较大限制了其某些方面的应用。性价比一般。

PuriMag bead:以200nm和400nm为主,近年新出现的优秀代表,以尺寸小磁响应强为典型特点,磁响应优于dynal的磁珠。性价比高。

FG bead:日本品牌,以180nm磁珠为主,与PuriMag bead磁珠性能相近,但价格远高于PuriMag bead。

Bangs bead:较著名的国外品牌,与dynal的产品类似,价格更昂贵。

JSR bead:日本品牌,以1um和2um磁珠为代表,物理吸附磁珠表现较为优异。性价比一般。


主要应用
1、基因纯化:利用硅基磁珠表面可以在一定条件下可逆性的吸附和解离DNA/RNA的特性,可以用于纯化基因、分离目的基因等,如提取基因组DNA,质粒DNA,病毒DNA,全血基因组DNA、RNA等。
2、蛋白质纯化:利用羧基、氨基、生物素、亲和素、巯基上交联上蛋白质对应的抗体,就可以高效、特异性的分离到相应的蛋白质。
3、细胞纯化:这方面已经成为免疫磁珠的主要应用,不多述了。
4、微生物富集:利用微生物相应的抗体免疫磁珠可以高效的可可逆性的富集相应的微生物。