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实验常用试剂的配制方案

2019-6-11 22:00:55点击:



1M Tris-HCl


 

□组份浓度 1M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)

□配制量 1L 

□配置方法

(1)称量121.1g Tris置于1L烧杯中。

(2)加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

(3)按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值 浓HCl
7.4 约70mL
7.6 约60mL
8.0 约42mL


(4)将溶解定容至1L。

(5)高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

  

1.5 M Tris-HCl


□组份浓度 1.5M Tris-HCl (pH8.8)

□配制量 1L

□配置方法

(1)称取181.7g Tris置于1L烧杯中。

(2)加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

(3)用浓盐酸调pH值至8.8。

(4)将溶液定容至1L。

(5)高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

 

10×TE Buffer

□组份浓度 100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA  (pH 7.4,7.6,8.0)


□配制量 1L 

□配置方法

(1)量取下列溶液,置于1L烧杯中。

      1M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0) 100mL 

      500 mM EDTA(pH8.0) 20mL 

(2)向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

(3)将溶液定至1L后,高温高压灭菌。

(4)室温保存。

 

3M 醋酸钠

□组份浓度 3M 醋酸钠 (pH5.2)


□配制量 100mL

□配置方法

(1)称取40.8g NaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

(2)加入冰乙酸调节pH值至5.2。

(3)加入去离子水将溶液定容至100mL。

(4)高温高压灭菌后,室温保存。

 

PBS Buffer

□组份浓度 137 mM NaCl,2.7mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4 


□配制量 1L  

□配置方法

(1)称量下列试剂,置于1L烧杯中。

NaCl 8g
KCl
0.2g
Na2HPO4
1.42g
KH2PO4 0.27g

2)向烧杯中加入约800 mL的去离子水,充分搅拌溶解。

(

(3)滴加HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。

(4)高温高压灭菌后,室温保存。

注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

 

10 M醋酸铵


□组份浓度 10 M  醋酸铵

□配制量 100mL 

□配置方法

(1)称量77.1g醋酸铵置于100~200 mL烧杯中,加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。

(2)加去离子水将溶液定容至100mL。

(3)使用0.22μm滤膜过滤除菌。

(4)密封瓶口于室温保存。

注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。

 

10%(W/V)SDS


□组份浓度 10%(W/V)SDS 

□配制量 100mL 

□配置方法

(1)称量10g高纯度的SDS置于100~200mL烧杯中,加入约80mL的去离子水,68℃加热溶解。

(2) 滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。

(3)将溶液定容至100mL后,室温保存。

 

 

2N NaOH


□组份浓度 2N NaOH 

□配制量 100mL  

□配置方法

(1)量取80mL去离子水置于100~200mL塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。

(2)称取8g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。

(3)待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100mL。

(4)将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。