论文信息

题目：Hybridization chain reaction-assisted CRISPR/Cas12a strategy for rapid and visual detection of Haemophilus influenzae

期刊：Frontiers in Cellular and Infection Microbiology

年份：2026

DOI：10.3389/fcimb.2026.1844708


作者：Chunfang Ma, Jiayi Zhang, Yayun Jiang, Xiangxiang Li


一、研究主旨


本文开发了一种基于 CRISPR/Cas12a + 杂交链式反应（HCR）+ 磁珠固相放大 的快速可视化病原检测平台，用于高灵敏检测儿童社区获得性肺炎重要病原菌——流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae）。


传统检测方法通常存在：


检测周期长；
依赖复杂仪器；
难以满足现场快速检测需求。


作者构建的检测体系通过磁珠固定核酸探针，实现：


靶DNA识别；
CRISPR/Cas12a激活；
HCR信号放大；
TMB显色输出；


最终实现快速、灵敏、肉眼可视化检测。


二、技术路线概述
Vi-CasHCP检测平台


核心流程：

H. influenzae DNA
        ↓
靶基因识别
        ↓
CRISPR/Cas12a激活
        ↓
PuriMag磁珠固定H0 DNA探针
        ↓
HCR信号放大
        ↓
SA-HRP结合
        ↓
TMB显色
        ↓
可视化检测


三、PuriMag磁珠应用信息（重点）
1. 磁珠来源


论文实验材料明确使用：Carboxyl-coated magnetic nanoparticles

供应商：PuriMag Biotechnology Co., Ltd.（Xiamen, China）

即：
PuriMag羧基功能化磁性纳米颗粒


四、PuriMag磁珠实验用途
核心作用：构建 DNA功能化磁珠探针（DNA-functionalized magnetic beads）


磁珠表面的羧基基团用于固定氨基修饰DNA探针：
PuriMag COOH Magnetic Nanoparticle
             ↓
        EDC/NHS coupling
             ↓
NH2-H0 DNA probe
             ↓
MNP-H0 probe

形成磁珠-DNA复合探针，用于后续CRISPR/HCR检测体系。


五、PuriMag磁珠实验参数（论文公开信息）
参数 信息
产品类型 羧基修饰磁性纳米颗粒
供应商 PuriMag Biotechnology Co., Ltd.
地区 厦门，中国
表面基团 Carboxyl (-COOH)
功能用途 DNA探针固定
修饰分子 NH₂-H0 DNA
偶联方式 羧基-氨基偶联
应用平台 CRISPR/Cas12a-HCR检测


六、磁珠在检测体系中的价值
① 高效固定核酸探针
PuriMag羧基磁珠提供稳定表面化学：支持DNA共价偶联；保持探针空间展示；提高反应效率。
② 提供磁分离能力
磁响应特性实现：快速分离；简化操作流程；适合快速检测平台。
③ 构建固相信号放大平台
磁珠不仅作为载体，同时作为：CRISPR/HCR反应界面

提高局部探针浓度，实现高灵敏检测。