技术简介

       在蛋白质组学中，高效分离蛋白质与小分子（如盐离子、去污剂、有机小分子等）是确保质谱分析灵敏度和准确性的关键环节。尤其在疾病标志物发现、药物开发及临床样本分析中具有重要应用。传统方法如甲醇-氯仿或丙酮沉淀依赖反复离心与干燥，易导致蛋白质聚集或低丰度组分丢失，且对强变性剂（如SDS）兼容性差；而过滤辅助样品制备（FASP）虽能去除小分子干扰，却因超滤膜吸附效应造成高分子量蛋白损失，步骤繁琐且难以处理微量样本。

       固相增强样品制备技术（single-pot, solid-phase-enhanced sample-preparation，SP3）[1]，通过磁珠表面动态亲水作用直接捕获蛋白质，在单管内即可完成杂质清除、蛋白富集与酶解消化，避免了传统多步骤分离流程，极大提升了实验通量和重复性。这一技术不仅解决了传统方法的局限性，更推动了蛋白质组学前沿领域的发展，是现代蛋白质组学标准化流程的核心工具之一。厦门普睿迈格生物推出自主研发的SP3-Carboxyl磁珠试剂盒。本磁珠以聚苯乙烯-纳米氧化铁复合材质为基核，通过创新工艺优化亲水表面特性（具有亲水和疏水表面供选择），具有接近100%的回收率，耐受1% SDS、6M尿素等强变性体系，适用于细胞、组织、体液等多类型样本，操作简便性等优势，提供比同类进口磁珠更高的性价比。（点击http://www.purimagbead.com/Product/1736805216.html获取产品更多详情）

技术流程和原理

       SP3是一种基于顺磁颗粒的蛋白质组预处理工作流程，通过有机溶剂乙醇或乙腈驱动驱动蛋白在羧基或其它亲水性磁珠表面被捕获。蛋白质通过亲水相互作用机制与磁珠结合，结合了蛋白的磁珠被束缚在溶剂化层，可冲洗去除不需要的污染物，然后在一定条件下洗脱纯化的蛋白质。

技术优势

• 简单，成本低，仅需磁力架和样品管，所有步骤都在单管中完成；
• 快速，整个蛋白质沉淀、洗涤、除盐及洗脱步骤，仅需20min；
• 接近100%回收率，无偏回收蛋白质；
• 适用体系广，能够适合多种缓冲盐体系，不同物种及不同蛋白量。

参考文献

Single-pot, solid-phase-enhanced sample preparation for proteomics experiments. Nat. Protoc. 2019, 14, 68-85